小鼠肝细胞作为一个生物医学领域常用的细胞实验模型,经常为广大科研工作者所接触,细胞的培养在实验中起到根基作用,如何争取的培养与使用,则是应用实操的关键。
目前细胞库内常用的肝细胞系有GHA1、AML12、BNL CL.2及各原代定制。动物细胞在体内有严密的组织结构,多数组织的形态是固体结构,细胞与细胞或者细胞与细胞间质之间联系紧密,要得到大量的离散细胞就必须进行人工分离(消化培养),也有部分组织的细胞自然状态下就是松散的,从体内取出后不用处理(如血细胞)或稍加处理(如脾细胞)就可以得到细胞悬液。细胞离散后由于每个细胞都能与支持物接触,营养供应均匀,因此适应快、增殖快、建系快。
肝脏是由肝细胞组成,肝细胞极小,肉眼看不到,必须通过显微镜才能看到。人肝约有25亿个肝细胞,50个肝细胞组成一个肝小叶,因此人肝的肝小叶总数约有50万个。肝细胞为多角形,直径约为20微米,有6-8个面,不同的生理条件下大小有差异,如饥饿时肝细胞体积变大。每个肝细胞表面可分为窦状隙面、肝细胞面和胆小管面叁种。肝细胞里面含有许许多多复杂的细微结构:如肝细胞核、肝细胞质、线粒体、内质网、溶酶体、高尔基氏体、微粒体及饮液泡等组成。
肝细胞具有多种功能且代谢旺盛,离体培养的大鼠肝细胞用于毒理学、药理学、生物化学及致癌作用等研究有许多优点。医学上常培养肝细胞作为理想的体外模型,在肝病研究、护肝药物的研发等诸多方面发挥着日益重要的作用,但肝细胞在体外增殖能力差,原代培养难以成功,故在一定程度上限制了肝细胞培养的广泛开展,制备小鼠肝细胞常用的方法有非酶分离细胞法、离体肝脏酶消化分离法以及在体肝脏酶灌注法。